Práctica ADN

EXTRACCIÓN DE ADN DE CÉLULAS VEGETALES

Objetivo y fundamento:

Intentaremos extraer ADN de células vegetales y aislarlo para verlo como grupos de largos filamentos blancos.

Para obtener el ADN de las células hay que romper primero la pared celular y la membrana. Luego, también hay que romper los núcleos y finalmente es necesario evitar que sea destruido por las enzimas celulares y hacer que precipite para poder observarlo.

• El lavavajillas rompe las membranas celulares y nucleares.
• La sal evita que las enzimas se unan al ADN y los destruyan.
• El alcohol hace que se desenrrolle y precipite.

Muestra:

Cada grupo puede utilizar un vegetal diferente. Parece ser que los más apropiados son cebolla, tomate, plátano o guisantes.

Materiales:

• Agua destilada (en su defecto podremos utilizar agua mineral)
• Lavavajillas
• Hielo
• Sal
• Alcohol de 96º (debe estar muy frío)
• Pipeta
• tubo de ensayo
• Vaso de precipitados de 250 y 500 ml
• Cristalizador
• Varilla de vidrio
• Cuchillo y cuchara
• Batidora

Procedimiento:

1. En el vaso de precipitados de 250 ml añade 3 cucharaditas de lavavajillas y una de sal y luego vierte unos 25 ml de agua destilada (con la pipeta). 
2. Introduce el vaso en un cristalizador con hielo, para mantenerlo frío.
3. Corta el vegetal en trocitos (tras eliminar la piel) e introdúcelos en el vaso de 500 ml.
4. Licúa el conjunto con la batidora, accionándola a velocidad máxima  durante periodos muy cortos de tiempo.
5. Añade el líquido obtenido al vaso de 250 ml, filtrándolo con un colador, llenándolo hasta la mitad aproximadamente. 
6. Agita bien el contenido del vaso durante unos minutos. 
7. Toma con la pipeta una pequeña cantidad de esta mezcla (unos 5 ml) y pásala al tubo de ensayo.
8. Añade un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado (5 ml), cuidadosa y lentamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el líquido.
9. Deja reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que veas que se forma una capa turbia entre el filtrado y el alcohol.
10. A continuación introduce la varilla en esa zona turbia y remuévela hasta que se vayan uniendo a ella unas pequeñas masas blancas de precipitado.
11. Espera unos momentos y luego extrae la varilla lentamente, para que no se desprenda el precipitado. Esas masas esponjosas son multitud de fibras de ADN entremezcladas.